冬棚混养的南美白对虾急性死亡,分离到哈维氏弧菌一例


广东省江门市睦州镇一冬棚罗氏沼虾和南美白对虾混养池塘,面积5亩,水深1.5米,3台增氧机(见图1)。2015年9月30日一次性放罗氏沼虾41万尾,南美白对虾20万尾,一直正常养殖到12月中旬,每天喂两餐,发病前几天每餐喂22斤饲料。
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2015年12月17日,养殖户正常抛网检查,从抛起的虾中发现3尾身体微微发红的南美白对虾,之前虾一直吃料正常,无明显异常现象。
   
18日抛网,从抛起的虾中发现20多尾身体微微发红的南美白对虾,在增氧机下捞出偷死虾10多斤,停料。
   
19日抛网,身体微微发红的南美白对虾已经占9成;在增氧机下捞出偷死虾200多斤,将池塘中的水排至60cm左右,同时外泼“碧水安”+“速解安”解毒增氧,并用“激活”+“活力钙”抗应激、提高免疫力。
   
20~23日,每天在增氧机下捞出100~200斤偷死虾,整个发病过程中仅少量罗氏沼虾死亡。
   
12月23日下午3:30到现场,测定水温24.4℃,水质指标:pH值8.4,亚硝酸盐0.1mg/L,氨氮测不出,溶解氧9.85 mg/L。池塘中可见少量红体游水的南美白对虾。抛网见多数虾体发红(见图2),从抛起的虾中取8尾身体发红的南美白对虾以及4尾罗氏沼虾(见图3),分别从所取的12尾虾的肝胰腺接种TCBS做细菌分离培养,并取鳃、肌肉和肝胰腺用95%酒精固定做病毒检测。
   
结果:在28℃经24小时培养,8尾南美白对虾中有7尾虾的肝脏培养出大量细菌,在弧菌培养基上菌落呈黄色,罗氏沼虾的肝胰腺中未分离出细菌(见图4),分离菌经16S rDNA测序鉴定为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi);PCR检测结果12尾发病虾白斑症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、桃拉病毒(TSV)、黄头病毒(YHV)、传染性肌肉坏死病毒(IMNV)、偷死野田村病毒(CMNV)都呈阴性(见图5)。
分析:1、本病例发病南美白对虾呈急性发病,发病虾身体微微发红,且具有传染性,养殖户怀疑是病毒病,但经过采样检测,所采集的虾病毒检测均呈阴性;罗氏沼虾无细菌分离出,但是多数南美白对虾肝胰腺中分离出大量哈维氏弧菌,这可能与南美白比罗氏沼虾对哈维氏弧菌更敏感有关。哈维氏弧菌是对虾养殖中重要的病原之一,因此本病例南美白对虾急性死亡的原因可能是感染哈维氏弧菌所致。
   
2、江门地区进入12月份以后,天气变化大,忽冷忽热,尤其是在下了两场大雨之后,很多虾塘出现红体游塘、偷死情况,可能跟天气变化引起池塘水质变化后细菌大量繁殖有关有关。(利洋公司研究所 雷燕提供 2016.03.31)
图1:发病池塘的基本情况
图2:从塘中抛网抛起的虾
从抛起的虾中取的8尾南美白对虾及4尾罗氏沼虾
图4:细菌分离培养结果
图5:病毒检测结果
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